电影《铁道游击队》讲述在抗日战争的背景下，鲁南临城和枣庄地区的铁路线上，一支活跃的游击队在队长刘洪和政委李正的带领下，积极与日军作斗争，取得了显著的战绩，赢得了民众对他们的美誉，称他们为“飞虎队”。然而，日军对他们展开了各种各样的偷袭，导致刘洪受了重伤。此时，寡妇芳林嫂走入了刘洪的生活，她照顾了伤员，使两人逐渐建立起深厚的感情。刘洪经过疗养恢复健康后，再次与李正并肩作战，成功击退了日军的进攻。然而，日军愤怒不已，试图通过残忍的手段激怒刘洪，鲁莽的刘洪被煽动，计划在微山湖与敌军展开正面对抗，幸得李正的劝阻才避免了一场惨烈的损失。经过一段时间的休整，“飞虎队”开始了对沿线日军的全面反击，但在执行侦察任务时，芳林嫂不幸被捕，为队伍的前途增添了不确定的阴影。本片通过描绘抗战游击队员的艰苦历程与斗争意志，使观众能感受到那个时代战士的无畏精神。同时，爱情的描写也为紧张的战斗增添了人性化的温情，展现了战争对人性的深刻影响。演员们的出色表演与紧凑的剧情都使得这段历史更加生动可信，让人铭记于心。